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病理實驗外包,病理染色常見染色介紹VonKossa染色:簡介:鈣結(jié)節(jié)的形成為成骨細胞特有,Vonkossa染色法是染色礦化結(jié)節(jié)的經(jīng)典方法,利用硝酸銀與鈣鹽的復(fù)分解反應(yīng)形成可被還原的銀鹽,在強光或紫外光下或者強還原劑作用下使其還原為黑色的金屬銀。簡要流程:石蠟切片/細胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→硝酸銀滴染→蘇木素染核→伊紅染色→脫水、透明、封片(中性樹膠)→Vonkossa染(鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,細胞核呈藍色,背景呈紅色;或者鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,背景呈紅色)。VonKossa染色利用金屬離子置換反應(yīng)檢測組織中鈣鹽沉積,由硝酸銀溶液中的銀離子置換組織中沉積的鈣離子。該染色可用于血管鈣化的檢測南京實驗醫(yī)學(xué)平臺一站式病理實驗外包檢測平臺。河北推薦的病理實驗外包
病理實驗外包,病理染色組織處理的要求:恰當(dāng)?shù)慕M織處理是做好免疫組化染色的先決條件,也是決定染色成敗的內(nèi)部因素,在組織細胞材料準(zhǔn)備的過程中,不僅要求保持組織細胞形態(tài)完整,更要保持組織細胞的抗原性不受損或彌漫,防止組織自溶。如果出現(xiàn)自溶壞死的組織,抗原已經(jīng)丟失,即使用很靈敏的檢測抗體和高超的技術(shù),也很難檢出所需的抗原,反而往往由于組織的壞死或制片時的刀痕擠壓,在上述區(qū)域易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。組織及時取材和固定組織標(biāo)本及時的取材和固定是做好免疫組化染色的關(guān)鍵第一步,是有效防止組織自溶壞死,抗原丟失的開始,離體組織應(yīng)盡快的進行取材,比較好2h內(nèi),取材時所用的刀應(yīng)銳利,要一刀下去切開組織,不可反復(fù)切拉組織,造成組織的擠壓,組織塊大小要適中,一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm,切記取材時組織塊寧可面積大,千萬不能厚的原則,(也就是說組織塊的面積可以大到3cm×5cm,但組織塊的厚度千萬不能超過0.2cm,否則將不利于組織的均勻固定)。固定液快速滲透到組織內(nèi)部使組織蛋白能在一定時間內(nèi)迅速凝固。從而完好的保存抗原和組織細胞形態(tài)。內(nèi)蒙古整體病理實驗外包病理實驗外包檢測-價格低-周期短-數(shù)據(jù)清晰。
有一定的幫助作用。采用免疫組化技術(shù)也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維,但所用抗體昂貴,操作費時,而采用天狼星紅染色試劑便宜,操作簡單。天狼星紅染色液操作步驟1、組織固定于10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。2、切片厚6μm,常規(guī)脫蠟至水。3、天狼星紅染色液滴染1h。4、流水稍沖洗,去除切片表面染液。5、Mayer蘇木素染色液染細胞核8~10min。6、流水沖洗10min。7、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。天狼星紅染色可用作肝纖維化以及腎纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。
病理實驗外包,病理染色切片常見問題及解決方法:1.切片彎曲且不能形成直帶●原因:①蠟塊上下或左右兩邊不平行。②蠟塊與切片刀刀口不平行。③組織塊外形不整齊。④切片刀各處的鋒利程度不一致?!窠鉀Q方法:①將蠟塊四邊反復(fù)修平對稱。②調(diào)節(jié)蠟塊夾持器,使其與切片刀平行。③修整組織塊時,注意修切整齊。④移動切片刀,更換刀口位置。2.切片上出現(xiàn)裂紋●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②組織中可能含有較硬之物質(zhì),如固定液之結(jié)晶石灰質(zhì)。③包埋時石蠟凍結(jié)太慢?!窠鉀Q方法:①切片刀某處有缺口,可調(diào)換刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口過多且不平整,可先將刀鋒垂直在磨刀石上輕輕磨數(shù)次,然后按常規(guī)磨刀田。②組織中硬性物質(zhì)太多,則不宜用。③糾正包埋時的缺點。一般待蠟塊周圍凝結(jié)一層,即可放入冷水中。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。病理實驗外包檢測那些事兒,南京英瀚斯生物。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹油紅O染色:油紅O脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅O進行染色的方法,油紅O為脂溶性染料,在脂肪內(nèi)能高度溶解,可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色。肝細胞內(nèi)的脂肪滴呈紅色,細胞核呈藍色1.標(biāo)本人或動物的肝組織等,甲醛—鈣液固定,冰凍切片,厚10μm。2.改良的油紅O染色液油紅O0.5g,50%乙醇100ml。將油紅O溶于乙醇內(nèi),且不斷攪拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩?.染色步驟①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油紅O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自來水終止分化;④蘇木素復(fù)染核,自來水返藍,甘油明膠封片。病理實驗外包檢測 承接各類大醫(yī)學(xué)實驗!專業(yè)!可靠。內(nèi)蒙古整體病理實驗外包
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病理實驗外包,病理染色常見染色介紹TTC染色:TTC染色是TTC和活細胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應(yīng),生成紅色的甲月贊,用來表示細胞的活力。配制多為2%,染色要避光,37度條件下,它是評價腦缺血損傷常用的指標(biāo)。TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感復(fù)合物,1894年初次合成用來檢測種子的生存能力,1958年開始用來染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色,而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降,不能反應(yīng),故不會產(chǎn)生變化呈蒼白。TTC可以被活細胞中的具有還原活性的酶(好像主要是琥珀酸脫氫酶)還原生成粉紅色的還原產(chǎn)物,所以活組織部分呈現(xiàn)粉紅色,而死亡的細胞的還原酶的活力已經(jīng)消失,因此TTC不能被還原,所以死亡的組織呈現(xiàn)白色。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。河北推薦的病理實驗外包
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